注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍Human TGF-β1 ELISA Kit (Human Transforming Growth Factor-β1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人转化生长因子β1 ELISA 试剂盒，可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 TGF-β1 浓度。转化生长因子β是调节细胞生长和分化的 TGF-β超家族。这一家族除 TGF-β1 至 TGF-β5 外，还有活化素、抑制素、缪勒氏管抑制物质(MIS)和骨形成蛋白(BMPs)。一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的 TGF-β，如成骨细胞、肾脏、骨髓和胎肝的造血细胞。TGF-β1 在人血小板和哺乳动物骨中含量最高。TGF-β1 以非活性状态存在，激活时是 TGF-β1 活性部分释放。TGF-β1 具有激活和抑制双重功能，在体外，TGF-β1 的活化是对其酸化。许多 TGF-β1 受体调节其生物活性，有受体 I(53-65KD) ，受体 II (83-110KD)，受体 III (250-310KD)，受体 IV (60KD)，受体 V (400KD)。TGF-β是由两个结构相同或相近的、分子量为 12.5 kDa 亚单位借二硫键连接成的二聚体。人 TGF-βcDNA 序列研究表明，单体的 TGF-β112 氨基酸残基是由含 400 氨基酸残基的前体分子从羧基端裂解而来。人 TGF-β1 基因定位于 19 染色体上，含有 7 个外显子。人和小鼠 TGF-β1 的同源性高达99%，不同种属中TGF-β都具有重要的生物学功能。TGF-β 的生物学功能主要在炎症、组织修复和胚胎发育等方面，TGF-β对细胞的生长、分化和免疫功能都有重要的调节作用。TGF-β可抑制免疫活性细胞的增殖；对细胞表型进行调节；抑制淋巴细胞的分化；抑制细胞因子产生；诱导或抑制原癌基因表达等。TGF-β在治疗伤口愈合，促进软骨和骨修复以及通过免疫抑制治疗自身免疫性疾病和移植排斥等方面有潜在的应用前景。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样品中人 TGF-β1浓度。在人TGF-β1单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的TGF-β1会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人TGF-β1抗体，抗人 TGF-β1抗体与结合在单抗上的人TGF-β1结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有TGF-β1，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在450 nm下测OD 值，人TGF-β1浓度与OD 450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中人TGF-β1浓度。
UE-H6136S/H6136M/H6136L◆没有信号？1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。◆整块板呈现规则蓝色？1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。◆标准曲线差？1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。
