注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍 Mouse IL-13 ELISA Kit (Mouse Interleukin-13 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即小鼠白细胞介素 13 ELISA 试剂盒，可以定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-13 浓度。小鼠 IL-13 基因位于 11 号染色体上，临近 IL-3，IL-4，IL-5 和 GM-CSF 基因，主要由活化的 Th2 淋巴细胞产生。IL-13 氨基酸序列与 IL-4 有 30%的同源性，因此，与 IL-4 有一些相同的生物活性。IL-13 可抑制单核细胞/巨噬细胞的细胞毒性作用和抑制其产生促炎细胞因子。虽然人或小鼠的 IL-13 对人 B 细胞的作用与 IL-4 相似，但小鼠的 IL-13 对小鼠 B 细胞没有任何作用。小鼠 IL-13 前体肽由 131 个氨基酸组成，切割掉 20 个氨基酸的信号肽后形成 111 个氨基酸的成熟肽。小鼠 IL-13 与人 IL-13 的氨基酸序列同源性为 58%，人和小鼠 IL-13 都可以作用于人的细胞。IL-4 是人和小鼠 T 细胞的生长、分化因子，与 IL-4 不同，IL-13 对人或小鼠 T 细胞没有作用。IL-13 的生物学活性由其细胞表面高亲和力受体复合物决定，功能性 IL-13 受体复合物由低亲和力的 IL-13 受体α链和 IL-4 受体α亚基组成。本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中小鼠 IL-13 浓度。在小鼠 IL-13 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-13 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗小鼠 IL-13 抗体，抗小鼠 IL-13 抗体与结合在单抗上的小鼠 IL-13 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-13，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，小鼠 IL-13 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 IL-13 浓度。
UE-M6143S/M6143M/M6143L◆没有信号？1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。◆整块板呈现规则蓝色？1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。◆标准曲线差？1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。
