注：终止液和显色剂具有腐蚀性，一旦接触到液体，请尽快用大量清水冲洗。
产品介绍Mouse IL-2 ELISA Kit (Mouse Interleukin-2 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即小鼠白细胞介素 2 ELISA 试剂盒，可以定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组 IL-2 浓度。白细胞介素 2 是一种多效性细胞因子，在机体的免疫应答中起重要作用。小鼠 IL-2 的 cDNA 序列含有 169 氨基酸的前体糖蛋白，裂解 20 个氨基酸残基的信号肽产生成熟 IL-2。天然 IL-2 在 N 端含有糖基，但糖基对 IL-2 的生物学活性无明显影响，等电点为 6.6-8.2。小鼠 IL-2 基因定位于第 3 号染色体。IL-2 最重要的作用是诱导 T 淋巴细胞增殖和分化，此外，IL-2 还可调节多种细胞的免疫应答如：促进 CTL、NK 和 LAK 等多种杀伤细胞的分化和效应功能，并诱导杀伤细胞产生 IFN-γ、TNF-α等细胞因子；直接作用于 B 细胞，促进其增殖、分化和 Ig 分泌；活化巨噬细胞等。小鼠和人 IL-2 基因 DNA 序列有 60％同源性。IL-2 具有沿种系谱向上有约束性，向下无约束性的特点：如人的IL-2 能促进小鼠 T 细胞的增殖，而小鼠的 IL-2 不能维持人 T 细胞的生长。IL-2 体内的半衰期只有 6.9 min。有报道用 PEG 对 IL-2 加以修饰，对生物学活性无影响，半衰期可延长 7 倍左右。目前关于 IL-2 的生物学作用大都是体外实验的结果。在体内，IL-2 有抗肿瘤、抗微生物感染、引起移植排斥和自身免疫以及免疫调节等作用。可溶性 IL-2R 作为免疫抑制剂，对白血病、移植排斥和自身免疫病可能有治疗作用。具有中和活性的抗 IL-2 抗体可抑制 IL-2 的生物学活性。本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法检测样品中小鼠 IL-2 浓度。在小鼠 IL-2 单克隆抗体预包被酶标板中加入适度稀释的样品和标准品，其中的 IL-2 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗小鼠 IL-2 抗体，抗小鼠 IL-2 抗体与结合在单抗上的小鼠 IL-2 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有 IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂出现蓝色；加终止液变为黄色。在 450 nm 下测 OD 值，小鼠 IL-2 浓度与 OD 450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠 IL-2 浓度。
UE-M6146S/M6146M/M6146L◆没有信号？1.试剂添加顺序错误或试剂配制不正确。重复实验；检查试剂配制方法；复核试验试剂添加流程。2.HRP被叠氮化合物污染。使用新鲜配制的试剂。3.抗体用量不足。检查是否使用了推荐的抗体量；增加抗体用量（浓度）。4.使用了含胎牛血清的缓冲液复溶抗体。检查使用的试剂。5.捕获抗体与板结合较差。使用ELISA板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。6.缓冲液受污染。新鲜配置缓冲液。◆整块板呈现规则蓝色？1.洗板不充分或跳过洗涤步骤未去除残留的非结合过氧化物酶。严格按照说明书洗涤流程操作。2.底物溶液预混太早不新鲜。底物溶液混合后须立即使用。3.封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染。每步均需使用新的封板胶纸或试剂储液槽。4.缓冲液有金属或HRP污染。新鲜配置缓冲液。◆标准曲线差？1.链亲和素-HRP结合物量不足。检查倍性稀释是否正确。2.捕获抗体与板结合较差。使用酶标板，而非组织培养板；使用不含其他杂蛋白的PBS溶解抗体。3.检测抗体量不足。检查稀释度是否正确。4.孵育时间不足。延长底物溶液孵育时间。5.实验操作流程有误。严格按照说明书操作流程。6.标准曲线稀释计算错误。重新计算制作新的标准曲线。
